外泌体研究解决方案——HansaBioMed

HansaBioMed LLC（http://www.exotest.eu）是一家完全致力于外泌体（exosomes）研究工具开发的欧洲公司。公司以“为生命科学领域外泌体研究开发和商业化相关专利技术、试剂盒以及相关设备”为使命。

HansaBioMed的研发生产基地位于爱沙尼亚首都塔林（Tallinn）科技园和意大利锡耶纳（Siena）。HansaBioMed公司可为全球生命科学市场提供最广泛的外泌体研究工具，是历史最悠久也是唯一一家只专注于提供高品质外泌体分离与分析相关产品的公司。目前公司主要提供的产品包括外泌体标准品（Exosome Standards）、外泌体结合抗体（Exosome binding Antibodies）以及特异性外泌体亚群富集试剂盒等。

同时，HansaBiomed公司与来自学术界和产业界的国际知名研究团体合作，进一步发展其技术平台以及独有的生物标志物产品线。学术合作单位包括罗马的Istituto Superiore di Sanità研究所、美国哈佛大学和耶鲁大学以及里加的拉脱维亚大学等。

核心产品线---

● 冻干纯化的外泌体标准品（Exosome Standards）

HansaBioMed提供的冻干外泌体从不同的生物来源获得，包括已被鉴定的健康供体体液如血浆、血清、尿液、唾液等以及不同类型的细胞培养上清。外泌体分离是通过超速离心结合膜超滤的方法，然后进行定量分析和总蛋白含量分析以及通过NANOSIGHT 可视型纳米颗粒分析仪确定外泌体颗粒数。冻干对于外泌体蛋白稳定性的影响与其他保存方法如-20C保存新鲜外泌体样本相比，基本相当。冻干的外泌体易于保存与运输，可长期稳定保存达36个月。

● 外泌体分离（Exosome Isolation）

超速离心是从生物体液或细胞上清分离外泌体的金标准方法。然而，该方法却不能有效的从小量样品中分离外泌体，超速离心需要昂贵的设备而且耗时。为了解决这些问题，HansaBioMed团队已经开发和优化出几款分离工具，可高效、快捷、较低成本的方式分离总外泌体和特定的外泌体亚群。主要包括：
EXO-Prep试剂：用于从生物体液（如血浆、血清和尿液等）和细胞培养基中高效分离总外泌体的新型一步法分离试剂。
ELISA免疫捕获微孔板：用特异性的外泌体标志物结合抗体预包被微孔板，来捕获或分离不同来源的外泌体。
免疫磁珠：胶乳免疫磁珠共价结合识别外泌体表面抗原的特异性抗体，来免疫捕获体液或细胞上清液中的外泌体。免疫捕获分离得到的外泌体可以回收并用于下游分析。

● 外泌体定量分析（Exosome quantification kits）

在基础和临床研究中，用外泌体评母细胞（parent cell）的功能状态，目前最大的阻碍是缺乏可靠的、价格合理、优化的工具用于定量分析复杂生物样品（例如血浆或尿液）中的外泌体。HansaBioMed推出一个创新的ExoTEST技术，可实现分离、量化和鉴定针对特定细胞类型或组织类型，或特定状态（如健康或疾病）下的循环外泌体。此外，HansaBioMed团队还推出了一款新型的用于分析外泌体标志物的流式细胞术试剂盒Exo-FACS，该试剂盒无需通过耗时的超速离心分离外泌体即可直接进行FACS分析。

● RNA提取试剂盒（RNA Extraction kits）

外泌体运载功能性RNA分子到靶细胞中，越来越多的证据表明外泌体来源的miRNA在特定的人类疾病的发展和/或进展中发挥重要作用。致病的miRNA可能被用作新型的治疗靶标或复杂疾病比如癌症的生物标志物。事实上，miRNA似乎作为转录和转录后表观调控因子发挥着重要作用，与肿瘤的病源、进展和预后关联起来了。已经观察到肿瘤组织样本和循环外泌体之间有相似的miRNA表达谱。HansaBioMed团队已研发出优化的可高效分离总RNA（miRNA和mRNAs）的试剂盒，可从总外泌体和微囊泡群或肿瘤特异性外泌体亚群中分离高质量的总RNA。目前可提供三种不同的试剂盒用于外泌体捕获及RNA提取。
EXO-TotalRNA：总外泌体免疫捕获和RNA提取试剂盒，通过免疫捕获可从人体液或细胞培养基中分离总外泌体和提取总RNA。
TumorEXO-TotalRNA：肿瘤外泌体免疫捕获和RNA提取试剂盒，通过免疫捕获从人体液中富集肿瘤特异性外泌体和提取总RNA。
RNA基础试剂盒：可从通过其他方法（如超速离心、化学沉淀、免疫捕获等）分离获得外泌体中提取RNA。

● DNA提取试剂盒（DNA Extraction kits）

除RNA外，近来已经在外泌体和微囊泡中检测到基因组单链或双链DNA和线粒体DNA。特别是大多数的双链DNA似乎与肿瘤来源的外泌体相关(Thakur BK et al. Cell research 24.6; 2014)。这一发现证实了外泌体的潜力，其可以从一个简单的血液测试检测游离肿瘤DNA。 HansaBioMed是第一家开发分离循环和外泌体相关的基因组DNA试剂盒的公司。

EXO-DNA试剂盒结合EXO-Prep试剂，可以从多种生物流体（血浆、尿液、血清等）或培养物上清液中方便的分离外泌体和纯化DNA。分离得到的外泌体经裂解后，用离心管和优化的缓冲液快速的纯化DNA（约30分钟）。此外，EXO-DNA试剂盒还提供冻干的外泌体用作质控对照。

● 外泌体标志物抗体（Antibody）

胞外囊泡包括外泌体，表达的抗原具有3D构象以及翻译后修饰，通常与胞内相应组分有较大差异。因此，市面上很多抗体都很难特异且高灵敏度的识别外泌体相关的抗原。通过与Exosomics Siena Spa合作, HansaBioMed已经验证了一系列检测通用标志物如CD63, CD81, ALIX及疾病特异的（如肿瘤和神经退行性疾病）的外泌体标志物抗体。

● 其他试剂盒（Assay kits）

HansaBioMed还提供多种生物检测试剂盒如细胞增殖检测试剂盒、蛋白提取试剂盒、细胞衰老检测试剂盒等。